图 1. CTS HiFi Cas9 蛋白 (CTS HF Cas9) 显著降低了原代 T 细胞中脱靶效应的发生率。将三种 Cas9 蛋白与三种 Invitrogen ™ TrueGuide ™ 合成 sgRNA 混合,形成九种复合物(RNP:50 pmol sgRNA、38 pmol Cas9、50 pmol dsTag,用于 Invitrogen ™ Neon ™ 转染系统中的 1.5 x 10⁶ T 细胞(100 µL)*)。使用 Neon 转染系统将每个 RNP 复合物递送到原代 T 细胞中。从 NGS TEG-seq 检测(点图)中获得每个 gRNA 的在靶和脱靶效应读数。每个脱靶/在靶比(蓝点)是根据单个脱靶的每百万读数 (RPM) 除以相应在靶的 RPM 计算得出的。红点代表相应的在靶,并标准化为 100%。 x 轴是任意的。CTS WT Cas9 是 CTS TrueCut Cas9 蛋白。